Реакции иммунной системы при сифилисе. Противосифилитические антитела

Treponema Pallidum

Сифилис — это инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (бактерией Treponema pallidum). Организм человека, заболевшего сифилисом, защищается от возбудителя заболевания с помощью механизмов иммунитета. Проникновение, длительное сохранение в организме (персистенция) и размножение возбудителя заболевания в организме хозяина приводят к выраженным изменениям со стороны иммунной системы.

После попадания бледных трепонем в организм и при их дальнейшем размножении, в организме больного человека происходят иммунные сдвиги. Механизм иммунного ответа при сифилисе исследован не полностью, однако имеются достаточно убедительные данные о том, что в этом процессе участвуют все звенья иммунной системы.

Активируются механизмы как врожденного неспецифического иммунитета, свойственного человеку как биологическуому виду, так и адаптивного, антиген-опосредованного иммунного ответа, вызванного контактом с антигеном. В иммунном ответе организма принимают участие как клеточные (макрофаги, Т-лимфоциты), так и гуморальные механизмы (синтез специфических иммуноглобулинов — антител).

Иммунную реакцию вызывают белки, входящие в состав структур бледной трепонемы; они являются чужеродными веществами для организма человека и относятся к антигенам. Все антигены трепонемы способны стимулировать организм больного вырабатывать антитела соответствующих классов. Вследствие этого, в сыворотке крови больных сифилисом отмечается множественность антител: протеиновых, комплементсвязывающих, полисахаридных реагинов, иммобилизинов, агглютининов.

Классы вырабатываемых антител меняются на разных этапах течения сифилиса — в различных стадиях болезни преобладают то одни, то другие антитела, относящиеся к разным классам иммуноглобулинов. Сила иммунного ответа и спектр антител, выявляемых на разных стадиях развития инфекции, зависит от особенностей организма у данного человека.

Сифилис принадлежит к инфекциям, хроническое течение которых вступает в несоответствие с выраженным иммунным ответом на антигены возбудителя. Иными словами, «иммунитет» (т.е. резистентность к инфекции) и «иммунные сдвиги» при сифилисе не совпадают, а иногда и противоречат друг другу.

Во многих случаях иммунологический ответ не предотвращает поэтапного развития инфекции. Организм хозяина неспособен уничтожить сифилитическую инфекцию, что приводит к дальнейшей эволюции патологического процесса. Болезнь, начавшись с местного процесса, распространяется на весь организм и продолжается много лет.

Клеточный и гуморальный иммунный ответ на внедрение бледной трепонемы в организм

В иммунном ответе организма на заражение принимают участие клеточные и гуморальные механизмы иммунитета.

Иммунный ответ при сифилисе

1. Клеточный иммунитет при заражении сифилисом

Клеточный иммунитет является одним из наиболее ранних ответов макроорганизма человека на внедрение бледной трепонемы и, в целом, играет значительную роль в формировании иммунной защиты и санации от сифилитической инфекции.

На клеточном уровне бледной трепонеме противодействуют высокоспециализированные клетки иммунной системы — макрофаги, T-лимфоциты, B-лимфоциты. Происходит изоляция и частичное уничтожение трепонем фагоцитами, в основном макрофагами. Фагоцитоз носит преимущественно незавершенный характер — при поглощении фагоцитом возбудитель не погибает, а остается в клетке, сохраняя свою структуру и способность к размножению. Более того, фагоцит оберегает от антител и воздействия антибиотиков бледную трепонему, которая становится недоступной для защитных сил организма.

Ранний сифилис характеризуется частичным угнетени­ем клеточного иммунитета и развитием состояния иммуносупрессии, постепенно нарастающей активизацией гуморального иммунитета. Клеточное звено страдает в первую очередь, так как Т-лимфоциты более чувствительны к воздействию бактерий T. pallidum.

У больных вторичным, латентным и третичным сифилисом формируется клеточный иммунитет, признаки которого выявляются в реакциях in vivo (кожные пробы) и in vitro (стимуляция Т-лимфоцитов трепонемными антигенами).

2. Гуморальный иммунитет при заражении сифилисе

Гуморальный иммунный ответ заключается в продукции широкого спектра противосифилитических антител. В структуре бледной трепонемы выявлено большое количество соединений, имеющих выраженные антигенные свойства для иммунной системы человека. На начальных этапах развития сифилиса происходит более выраженный синтез антител к антигенам, имеющим высокое содержание в клетке T. pallidum и локализующимся в структуре мембран наружной клеточной стенки или протоплазматического комплекса.

3. Уклонение бледных трепонем от иммунного ответа

Клеточное и гуморальное звенья иммунитета не в состоянии обеспечить полное уничтожение и элиминацию бледных трепонем. Благодаря своему необычному молекулярному строению, T. pallidum обладает замечательной способностью уклоняться от защитной реакции макроорганизма.

В геноме T. pallidum существует нескольких повторяющихся участков, отвечающих за синтез белков, определяющих взаимодействие с иммунной системой организма. «Ускользание» бледной трепонемы от иммунной системы обусловлено вариабельностью этих поверхностных белков, структура которых определяется вариабельностью генов. Этот феномен способствует сохранению бледной трепонемы в организме, в том числе при скрытой инфекции.

Электронно-микроскопические исследования показали, что при сифилисе преобладает незавершенный фагоцитоз трепонем (захват и поглощение трепонем лейкоцитами, макрофагами и другими клетками). При этом трепонемы не погибают, а получают защиту от антибиотиков и антител, и могут даже размножаться в фагоцитирующей клетке. В течение всего инкубационного периода, а также в конце первичного и в начале вторичного периодов сифилиса, возбудители активно размножаются и распространяются по всему организму.

Гуморальный иммунный ответ. Противосифилитические антитела.

Гуморальный иммунный ответ заключается в продукции широкого спектра антител, которые можно разделить на две группы. Противосифилитические антитела могут быть неспецифическими — их называют «реагины» (или антикардиолипиновые антитела) и специфическими (противотрепонемные антитела).

Иммунный ответ при сифилисе

1. Неспецифические антитела при сифилисе

Неспецифические антитела при сифилисе — это антикардиолипиновые антитела, исторически получившие название «реагины». Они направлены против липидных антигенов бледной трепонемы и против аутоантигенов, появляющихся вследствие повреждения и разрушения клеток больного.

Реагиновые антитела у больного сифилисом — это иммуноглобулины класса IgG и IgM. Они являются комплексным ответом на высвобождение липоидных молекулярных фрагментов из поврежденных клеток хозяина, а также на появление липопротеиноподобных структур, сходных с кардиолипином, входящих в состав бактериальной клетки бледной трепонемы.

Липидные антигены cоставляют значительную часть бактериальной клетки T. pallidum. Помимо других антигенов, в клеточной стенке бледной трепонемы содержится фосфолипид кардиолипин; на его долю приходится около 30% сухого вещества клетки спирохеты. В организме человека, больного сифилисом, могут присутствовать липиды, имеющие сходное строение с липоидными структурами клеточной стенки бледной трепонемы. Это аутоантигены, образующиеся в результате разрушения органов и тканей, в основном липиды митохондриальных мембран.

Аутоантигены — это компоненты клеток и тканей собственного организма, которые распознаются при определённых условиях как частично чужеродные. Аутоантитела к кардиолипину – это антитела, направленные организмом против собственного кардиолипина.

Клетки человека, больного сифилисом выделяют в большом количестве липоидный и липопротеиноподобный материал, сходный с кардиолипином. Бледная трепонема приводит к поражению внутренних органов, в частности, к повреждению печени и сердца, освобождая некоторые фрагменты тканей. При интенсивном размножении спирохет в организме больного происходит распад тканей, в результате чего из поврежденных клеток высвобождаются липоидные молекулярные фрагменты.

Иммунная система пациента реагирует, вырабатывая реагиновые антитела на эти фрагменты. Продукты распада клеток — липоидные белки — поступают в кровяное русло. Эти белки являются чужеродными для организма человека, поэтому реакция организма проявляется в виде выработки неспецифических антител (иммуноглобулинов) класса IgM и IgG к липоидному и липопротеиноподобному материалу. Именно эти антитела исторически называются реагинами.

Следует иметь в виду, что реагины с помощью кардиолипиновых тестов могут обнаруживаться в организме людей, никогда не болевших сифилисом, т.к. их количество повышается при различных физиологических и патологических состояниях, не связанных с сифилисом, например у пациентов с аутоиммунными, воспалительными и гематологическими заболеваниями. Эти реагины могут быть причиной так называемых биологических ложноположительных серологических реакций на сифилис.

Антилипидные (неспецифические) антитела появляются в организме человека со стадии первичного сифилиса —примерно через 7-14 дней после образования твердого шанкра, через 4-5 недель после заражения.

Антитела против кардиолипина выявляют посредством нетрепонемных серологических тестов. При нетрепонемных методах анализа на сифилис не различают тип антител (IgG, IgM или др.), а определяют суммарный ответ.

2. Специфические антитела при сифилисе

Специфические антитрепонемные антитела направлены против бледной трепонемы. Плазматические клетки организма вырабатывают специфические антитела, направленные против соответствующих антигенов возбудителя заболевания.

На ранних этапах развития сифилиса, как бактериальной инфекции, у заболевшего человека осуществляется выработка специфических антител, относящихся преимущественно к иммуноглобулинам класса M (первичный иммунный ответ). Трепонемоспецифические Ig класса M у больных сифилисом могут регистрироваться даже в период инкубации. Позднее происходит переключение на синтез IgG (вторичный иммунный ответ).

Параметры иммунного ответа могут изменяться в результате проводимого лечения. Адекватное лечение раннего сифилиса приводит к быстрому снижению титров неспецифических антител и специфических IgM.

По мере развития патологического процесса постепенно включаются механизмы образования антител классов G и А. Ведущая роль в гуморальном ответе переходит к специфическим антителам IgG и IgА. При этом специфические IgG обычно сохраняются в сыворотке крови в течение длительного периода времени,а иногда и всю жизнь

Читайте также:  На каком свидании можно переспать с мужчиной чтобы не разрушить романтические отношения

Динамика образования специфических антител у больного при сифилисе

По данным современных исследований, гуморальный ответ при сифилисе происходит в соответствии с общими закономерностями для бактериальных инфекций. Вначале вырабатываются иммуноглобулины класса M против наиболее иммуногенных и специфичных антигенов возбудителя. Специфические антитела класса M способны выявляться в крови пациентов, инфицированных T. pallidum, на самых ранних этапах развития инфекции, уже через 1,5-2 недели после заражения, что клинически соответствует скрытому инкубационному периоду заболевания. При первичном и вторичном сифилисе содержание указанных антител в крови больных быстро нарастает и сохраняется на высоком уровне; максимальное их содержание у больных сифилисом приходится на 6—9-ю неделю заболевания.

После успешного лечения антибактериальными препаратами специфические IgM у больных относительно быстро элиминируют из кровотока (через 3—12 месяцев). При лечении раннего сифилиса IgM исчезают через 3-6 месяцев, позднего – через 1 год. Большое диагностическое значение приобретает выявление антитрепонемных антител IgM в крови новорожденных. Так как IgM не проходит через плаценту, выявление антитрепонемных IgM-антител у новорожденного указывает на врожденный сифилис. Точно так же IgM-антитела не проникают через гематоэнцефалический барьер, и их появление в спиномозговой жидкости говорит о нейросифилисе.

Многие лабораторные методики диагностики сифилиса основаны именно на выявлении трепонемоспецифических IgM. Например, иммуноферментный анализ (ИФА) на твердой фазе и линейный иммуноблоттинг (ИБ) на микропористых стрипах с использованием антивидовых конъюгатов на основе моноклональных антител к тяжелой мю-цепи в структуре IgМ человека, а также реакция непрямой иммунофлюоресценции (РИФ) с исследованием 19S-фракции сыворотки крови, содержащей тяжелые IgМ.

Раннее определение специфических IgM также может быть применено для своевременного выявления случаев раннего врождённого сифилиса (определение специфических IgM в крови новорожденных) или случаев реинфекции у пациентов, ранее перенесших сифилис.

Без лечения, по мере развития болезни и разрешения клинических проявлений вторичного периода, уровень специфических IgМ в крови больных сифилисом постепенно понижается и начинает преобладать синтез IgG. Развитие иммунного ответа на антигенную стимуляцию в организме больного сифилисом сопровождается постепенным переключением с синтеза антител класса M на продукцию более мелких молекул иммуноглобулинов класса G.

Специфические иммуноглобулины класса G в кровотоке больных сифилисом появляются более поздно, в конце 3-й или на 4-й неделе после заражения и, как правило, достигают более высоких титров, чем IgM. Уже на 6 неделе после инфицирования уровень IgG преобладает над уровнем IgM и может сохраняться в таком состоянии годы.

Содержание специфических IgG, постепенно увеличиваясь, достигает максимальной выраженности через 1—1,5 года, после чего несколько снижается, подвергаясь волнообразным колебаниям в зависимости от активности инфекционного процесса. Количество специфических IgG в циркулирующей крови после адекватно проведенного лечения снижается медленно. Антитела этого класса могут сохраняться даже после клинического излечения пациента в течение десятков лет или пожизненно.

Кроме перечисленных видов антител, в гуморальном иммунитете при сифилисе принимают участие иммуноглобулины класса А. Антитела IgA вырабатываются в сравнительно небольших количествах. Вопрос о синтезе IgE и IgD в настоящее время изучен недостаточно.

Анализ крови RW – реакция Вассермана

Анализ крови RW – это серологический анализ на выявление антител к бледной трепонеме. Методика проведения этого исследования была предложена Августом фон Вассерманом еще в начале XX века, с тех пор анализ носит его имя – реакция Вассермана (RW).

Бледная трепонема является возбудителем сифилиса.

Сифилис относится к классическим венерическим заболеваниям. Передается преимущественно половым путем. Заразиться также можно через кровь. Есть вероятность заражения бытовым путем, поскольку бледная трепонема может содержаться в невысохшей слюне и других выделениях организма.

В течении болезни выделяют первичный, вторичный и третичный сифилис.

Первичный сифилис характеризуется появлением специфической язвы (твердый шанкр) в месте проникновения инфекции (это могут быть половые органы, слизистая рта или прямой кишки). Чуть позже увеличиваются ближайшие лимфатические узлы – паховые при поражении половых органов или подчелюстные при поражении слизистой рта. Язва заживает самостоятельно через 3-6 недель после возникновения.

Симптомы вторичного сифилиса наблюдаются через 4-10 недель после возникновения язвы. Это – бледная сыпь по всему телу (включая ладони и подошвы), головная боль, общее недомогание и повышение температуры тела (похоже на грипп). Увеличиваются лимфатические узлы по всему телу. Потом симптомы исчезают, возвращаясь время от времени.

Третичный сифилис характеризуется поражением нервной системы, костей и внутренних органов. Он возникает через много лет после заражения при отсутствии должного лечения заболевания.

Таким образом, у человека, больного сифилисом, могут быть длительные периоды, в течение которых какие бы то ни было симптомы отсутствуют. Многое зависит от состояния иммунной системы организма. Иногда при контакте с инфекцией болезнь не развивается, но человек становится носителем инфекции (так называемое бессимптомное носительство).

В этих ситуациях анализ крови RW оказывается единственным способом обнаружить присутствие возбудителя сифилиса в организме. Анализ также дает возможность установить, как долго продолжается носительство сифилиса.

Когда необходим анализ крови RW?

Анализ крови RW является стандартной процедурой для подтверждения отсутствия возбудителя сифилиса в организме. Он необходим всем, чья профессия предполагает контакты с людьми или продуктами питания – врачам, косметологам, парикмахерам, поварам и т.д. Анализ крови RW также входит в число обязательных процедур при ведении беременности. Он проводится при постановке на учет и в третьем триместре (на 30-й неделе).

Анализ RW может назначаться и при появлении симптомов, заставляющих подозревать возможность заражения сифилисом:

  • сыпи на коже и слизистых оболочках неясного происхождения;
  • увеличении лимфатических узлов (прежде всего, паховых);
  • язвах на слизистой и выделениях из половых органов.

Рекомендуется сдавать анализ RW при случайном половом контакте. Однако надо иметь в виду, что анализ будет показателен только через 5-6 недель после полового контакта. До того анализ может быть отрицательным даже при проникновении инфекции.

Как сдавать кровь на RW?

Анализ крови RW следует сдавать натощак. В течение 12 часов перед анализом нельзя курить, употреблять спиртное, принимать лекарства, пить соки, чай или кофе. Можно пить только воду.

Расшифровка результатов анализа крови RW

Результат анализа крови RW может быть:

Изображение 1: Анализ крови RW – реакция Вассермана - клиника Семейный доктор

Реакция Вассермана

  • отрицательным. Это означает, что антитела к возбудителю сифилиса не обнаружены. В большинстве случаев подобный результат говорит о том, что бледной трепонемы в организме нет. Однако при первичном и третичном сифилисе могут быть случаи отрицательного результата анализа. Поэтому, чтобы быть уверенным, что не являешься носителем заболевания, анализ необходимо сдать несколько раз.
  • сомнительным (отмечается знаком «+»);
  • слабоположительным («++»);
  • резко положительным («+++»).

Сомнительная и слабоположительная реакция возможны и при отсутствии заражения сифилисом. Так, у 1,5% беременных выявляется ошибочная слабоположительная реакция. Ложноположительный результат RW может наблюдать после прохождения вакцинации, а также при туберкулезе, сахарном диабете, онкологических заболеваниях, пневмонии, вирусном гепатите.

Если есть вероятность ложноположительного результата, анализ следует сдать повторно.

Что делать при положительном результате RW?

При получении положительного результата RW при повторном анализе присутствие возбудителя сифилиса в организме считается подтвержденным. В этом случае необходимо срочно начинать лечение.

Сифилис хорошо поддается лечению, особенно на ранних стадиях. Сохранение возбудителя в организме грозит переходом заболевания в активную стадию и развитием проявлений вторичного и третичного сифилиса. Наличие бледной трепонемы в организме беременной женщины угрожает не только ее здоровью, но и здоровью ребенка: инфицирование плода, как правило, приводит к серьёзным нарушениям развития. Возможен и летальный исход.

Где сдать анализ RW в Москве?

Если Вам нужно сделать анализ крови RW в Москве, обращайтесь в АО «Семейный доктор». В «Семейном докторе» Вы можете сдать анализ на RW в выходные и праздничные дни.

Сдать кровь на RW возможно в любой из наших поликлиник. Акушеры-гинекологи, дерматовенерологи и урологи «Семейного доктора» всегда готовы проконсультировать Вас по результатам анализа и, при необходимости, назначить эффективный курс лечения.

Оставьте телефон –
и мы Вам перезвоним

Не занимайтесь самолечением. Обратитесь к нашим специалистам, которые правильно поставят диагноз и назначат лечение.

Антитела к treponema pallidum

ЗАО «ЭКОлаб», Электрогорск (Московская обл.)

ЗАО «ЭКОлаб», Электрогорск (Московская обл.)

ГБУЗ «Центр планирования семьи и репродукции» Министерства здравоохранения Краснодарского края, Краснодар

ГБУЗ «Центр планирования семьи и репродукции» Министерства здравоохранения Краснодарского края, Краснодар

Отечественная тест-система Лайн-Блот Сифилис-IgM для определения IgM-антител к Treponema pallidum методом линейного иммуноблоттинга

Журнал: Клиническая дерматология и венерология. 2013;11(5): 40‑43

Марданлы C.Г., Арсеньева В.А., Анискова И.Н., Жигаленко А.Р. Отечественная тест-система Лайн-Блот Сифилис-IgM для определения IgM-антител к Treponema pallidum методом линейного иммуноблоттинга. Клиническая дерматология и венерология. 2013;11(5):40‑43.
Mardanly CG, Arsen’eva VA, Aniskova IN, Zhigalenko AR. The Russian Light-Blot Syphilis-IgM test system for the identification of IgM antibodies to Treponema pallidum by linear immunoblotting. Klinicheskaya Dermatologiya i Venerologiya. 2013;11(5):40‑43. (In Russ.).

Читайте также:  Мужчина-Овен - характеристика знака Зодиака

ЗАО «ЭКОлаб», Электрогорск (Московская обл.)

Разработана отечественная тест-система Лайн-Блот Сифилис-IgM на основе метода линейного иммуноблоттинга с использованием рекомбинантных антигенов Treponema pallidum. Показана ее высокая диагностическая эффективность при использовании в качестве подтверждающего теста при серологической диагностике сифилиса.

ЗАО «ЭКОлаб», Электрогорск (Московская обл.)

ЗАО «ЭКОлаб», Электрогорск (Московская обл.)

ГБУЗ «Центр планирования семьи и репродукции» Министерства здравоохранения Краснодарского края, Краснодар

ГБУЗ «Центр планирования семьи и репродукции» Министерства здравоохранения Краснодарского края, Краснодар

Несмотря на снижение в последние годы доли сифилиса в структуре инфекций, передаваемых половым путем [1], он остается социально значимым заболеванием, требующим повышенного внимания специалистов в области здравоохранения.

Следует учитывать также, что одновременно со снижением заболеваемости манифестными формами сифилиса увеличилась доля его скрытых форм, как ранних, так и поздних, что характерно для периода угасания эпидемического процесса. В структуре поздних форм сифилиса повысился удельный вес нейросифилиса, причем увеличилась доля больных ранним и поздним нейросифилисом. Увеличилась доля скрытого сифилиса как раннего, так и позднего [2].

Основным инструментом лабораторной диагностики сифилиса являются серологические исследования, начинающиеся, как правило, со скрининга с использованием таких неспецифических (нетрепонемных) тестов, как реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, и заканчивающиеся подтверждающими исследованиями с использованием таких специфических (трепонемных) тестов, как реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), иммуноферментный анализ (ИФА), позволяющих определить наличие и содержание в крови пациента видоспецифических антител классов М, А и G. В последние годы в качестве подтверждающих методов исследования на сифилис все шире используют иммуноблоттинг (ИБ) — выявление и оценку содержания антител к отдельным антигенам Treponema pallidum, иммобилизованным на нитроцеллюлозной мембране [3—6].

В настоящее время в России зарегистрированы две отечественные тест-системы для проведения указанных исследований — Трепонема-Блот (ЗАО БТК «Биосервис») и Лайн-Блот Cифилис-IgG (ЗАО «ЭКОлаб»), ориентированных на определение только IgG-антител.

В то же время в диагностике заболевания и определении его стадии особое значение имеет выявление антитрепонемных антител класса М. Наличие IgM-антител можно рассматривать как достоверный маркер активного инфекционного процесса. При этом следует учитывать, что указанные антитела выявляются в 100% случаев только при врожденном сифилисе, при первичном — приблизительно в 80% случаев, при вторичном — в 60%, при латентном — в 50%, при нейросифилисе — в 34% и при третичном — только в 11% случаев. При успешном лечении титр IgM-антител снижается до неопределяемых значений. Обнаружение IgM-антител к T. pallidum в крови новорожденного подтверждает диагноз «врожденный сифилис». Отсутствие IgM-антител у младенца, родившегося от больной сифилисом матери, не исключает наличия врожденного заболевания. Кроме того, отрицательный результат IgM-антителообразования может свидетельствовать об отсутствии болезни или ее слишком раннем сроке, когда не выработался иммунный ответ или о достаточно давнем (более 1 мес) инфицировании [3—5].

В связи с этим представляется актуальной разработка отечественной тест-системы для проведения ИБ для выявления IgM-антител к T. pallidum.

Материал и методы

За основу разработки была взята тест-система Лайн-Блот Cифилис-IgG (Регистрационное удостоверение №ФСР 2010/06925 от 01.03.10), т.е. новая тест-система Лайн-Блот Cифилис-IgG представляет собой набор реагентов, рассчитанный на исследование 24 образцов сыворотки (плазмы) крови или ликвора человека на наличие и содержание IgM-антител к четырем антигенам T. pallidum — TpN15, TpN17, TpN47 и TmpA.

В новый набор входят:

— иммуносорбент — тест-полоски (стрипы) из нитроцеллюлозной мембраны, на каждую из которых в виде поперечных полос нанесены рекомбинантные аналоги указанных антигенов T. pallidum, а также пять контрольных линий (см. рисунок); Рисунок 1. Схема нанесения антигенов T. pallidum, контролей и калибраторов на нитроцеллюлозном стрипе в наборе реагентов Лайн-Блот Cифилис-IgG.

— 10-кратный концентрат промывочного раствора;

— раствор для разведения исследуемых образцов;

— субстратный раствор — раствор хромогенного субстрата для выявления ферментативной активности щелочной фосфатазы;

— референс-стрип — образец-шаблон со стрипом той же серии, что и иммуносорбент, проинкубированным с положительной, ранее охарактеризованной сывороткой, содержавшей IgМ-антитела;

— конъюгат — антитела козьи к IgМ человека, конъюгированные с щелочной фосфатазой.

Кроме того, новый набор включает РФ-сорбент — антитела козьи к IgG человека, используемый для удаления IgМ-антител ревматоидного фактора, а также избытка IgG-антител.

Кроме линий (зон) рекомбинантных антигенов, на каждом стрипе имеются пять контрольных линий. Линия контроля антигена (КАГ) — для оценки корректности проведения теста на данном образце (при правильно проведенном исследовании эта полоса не окрашивается). Три калибровочные линии, которые при проведении анализа дают зоны дискретно уменьшающейся интенсивности окрашивания, соответствующие баллам 3+, 1+, 0,5+. Линия контроля внесения образца — для самоконтроля (должна быть окрашена при правильном проведении исследования).

Процедура ИБ с использованием новой тест-системы отличается от процедуры ИБ с использованием оригинала только предварительной обработкой исследуемых образцов РФ-сорбентом (образец разводят 1:1 и после 30-минутной инкубации при комнатной температуре центрифугируют 5 мин при 2000 об/мин, в дальнейшем исследовании используют супернатант).

Регистрация, учет и интерпретация результатов проводятся по тем же правилам, которые были разработаны для прототипа.

Тест-система прошла технические и медицинские испытания в Государственном научном центре дерматовенерологии и косметологии, где продемонстрировала 100% диагностическую чувствительность и специфичность.

Результаты

Диагностическая эффективность тест-системы Лайн-Блот Cифилис-IgG была оценена на 126 образцах сывороток крови и 31 спинномозговой жидкости, полученных от пациентов, проходивших обследование на сифилис в Московской городской клинической больнице №14 им. В.Г. Короленко и в ГБУЗ «Центр планирования семьи и репродукции» Минздрава Краснодарского края (Краснодар).

В число обследуемых лиц вошли:

1) лица, имевшие половой контакт с лицом, имеющим установленный ранее диагноз сифилиса (17 человек);

2) лица с положительными нетрепонемными реакциями (10);

3) лица с положительным результатом на наличие IgM-антител в ИФА (9);

4) лица с подозрением на первичное заражение (14);

5) лица с подозрением на реинфекцию при вторичном сифилисе (17);

6) лица, проходящие плановое обследование, в том числе беременные (27);

7) лица с наличием клинических проявлений заболевания (10);

8) лица, имевшие половой контакт с лицом, имевшим установленный ранее диагноз «нейросифилис» (1);

9) лица с подозрением на ранний скрытый сифилис (17);

10) лица с подозрением на неуточненный скрытый сифилис (1);

11) лица с подозрением на ранний врожденный сифилис (3).

Образцы сывороток крови были предварительно аттестованы в ИФА с использованием иммуноферментных тест-систем для выявления IgM-антител к T. pallidum (ЗАО «ЭКОлаб», ЗАО «Вектор-Бест», ООО НПО «Диагностические системы», ЗАО «МБС»), а также в РИФабс с использованием «Антипаллидум-Флюороген-IgM/IgG» — диагностикума для выявления антител классов М и G к T. pallidum в РИФ (ЗАО «ЭКОлаб»). Образцы ликвора предварительно исследовали теми же методами с использованием тест-систем тех же производителей для выявления IgG- и IgM-антител.

Предварительная оценка на наличие IgM-антител к T. pallidum в 126 образцах сыворотки крови в ИФА и РИФабс дала 54 положительных, 50 отрицательных и 22 сомнительных результата. При этом ИБ в тест-системе Лайн-Блот Cифилис-IgG подтвердил 53 положительных, 48 отрицательных и 6 сомнительных результатов; 1 отрицательный и 12 сомнительных результатов были переквалифицированы в положительные, 3 сомнительных получили отрицательную оценку и по одному образцу, предварительно оцененному как положительный и отрицательный, были переквалифицированы в сомнительные.

Для 19 образцов, предварительные оценки которых не совпали с оценкой в ИБ с новой тест-системой, был дополнительно проведен ИБ с использованием тест-системы Treponema Pallidum-WESTERNBLOT («EuroImmun», Германия). Результаты сравнительного анализа ИБ этих образцов сыворотки крови в новой тест-системе и тест-системе Treponema Pallidum-WESTERNBLOT представлены в таблице.

Как следует из таблицы, получено практически полное совпадение оценок в обеих тест-системах (коэффициент корреляции ранговых оценок составил 0,93).

Предварительное исследование образцов ликвора в ИФА, РПГА и РИФабс дало во всех случаях отрицательный результат по наличию IgM-антител к T. pallidum. IgG-антитела обнаружены в 14 образцах, 12 образцов по наличию этих антител были оценены как отрицательные, 5 — как неопределенные.

ИБ всех образцов ликвора был выполнен с использованием как новой тест-системы, так и тест-системы-прототипа (Лайн-Блот Cифилис-IgG). Его результаты полностью совпали с данными предварительной оценки образцов.

Обоснованность включения в состав нового набора РФ-сорбента, т.е. целесообразность предварительной обработки им исследуемых образцов, показана при исследовании 23 образцов сыворотки, которые давали положительный результат при исследовании на РФ-фактор. ИБ этих образцов без предварительной обработки РФ-сорбентом дал 17 отрицательных и 6 сомнительных результатов, а ИБ после такой обработки — 21 отрицательный и 2 сомнительных результата соответственно, что позволяет говорить о существенном повышении диагностической специфичности набора.

Читайте также:  Как довести мужчину до оргазма

Заключение

Разработка технологий производства рекомбинантных антигенов Treponema pallidum способствовала широкому внедрению в серологическую диагностику сифилиса методов ИФА, в том числе ИБ в формате лайн-блоттинга, реализацией которого явилась разработка тест-системы Лайн-БлотCифилис-IgG.

Использование ИБ особенно важно при необходимости верифицировать диагноз в сложных случаях, в частности для серологической диагностики во второй половине инкубационного периода, диагностики скрытого врожденного сифилиса в первые дни жизни ребенка, выявления скрытого сифилиса у лиц со слабым гуморальным ответом, а также для дифференцирования ложноположительных и противоречивых результатов серореакций [7—10].

Поскольку в пуле исследованных образцов были представлены фактически все указанные случаи, результаты испытаний новой тест-системы Лайн-Блот Cифилис-IgG позволяют высоко оценивать ее диагностическую эффективность как подтверждающего теста в комплексной серологической диагностике сифилиса.

Когда и как нужно провериться на сифилис. Как узнать время заражения

You are currently viewing Когда и как нужно провериться на сифилис. Как узнать время заражения

Врач гинеколог-онколог. Руководитель сети Университетских клиник. Эксперт по патологиям вульвы и шейки матки, ведущий консультирующий врач в Центре патологии шейки матки в Санкт-Петербурге. Стаж 20+ лет. Принимает в Университетской клинике. Стоимость приема 2500 руб.

  • Запись опубликована: 08.04.2019
  • Reading time: 3 минут чтения

Понятие «звездная болезнь» в начале XX века было связано далеко не со знаменитостями. Так в те годы называли сифилис. При этом заболевании на теле появляется мелкая сыпь, похожая на звёздочки. Болезнь даже была описана в рассказе М. Булгакова «Звездная пыль».

Ситуаций, характерных для начала прошлого века, когда сифилисом болели целые деревни, сейчас уже нет. Но это не значит, что заболевание кануло в Лету.

Как возникает сифилис и легко ли им заразиться

Помните шутку, когда в анализах нашли только спирохету, и то какую-то бледную. Действительно, сифилис вызывается бледной трепонемой, относящейся к роду спирохет. Однако этот микроорганизм, называемый на латыни Treponema pallidum, шутить не любит, приводя к серьезным осложнениям. В отличие от других возбудителей венерических заболеваний, он передается не только половым, но и бытовым способом. Поэтому подхватить болезнь можно при обычном контакте.

Чаще всего бытовой формой заражаются дети, но ее могут подхватить и взрослые. Заражение происходит при пользовании общей посудой, предметами обихода, бельем. Подцепить инфекцию можно даже в парикмахерской, маникюрном или тату-салоне, если там не сильно «заморачиваются» гигиеной и стерилизацией.

Инфекция, которая бушевала в 90 годах и позже, пошла на спад, сейчас опять подняла голову и грозит практически любому. Трепонема живёт и процветает, в частности, благодаря наплыву нелегальных трудовых мигрантов, состояние здоровья которых иногда не проверялось по многу лет. Больной не только губит свое здоровье, но и становится источником заражения для окружающих – коллег, членов семьи.

Симптомы заболевания. Когда лучше остаться с носом

Болезнь начинается примерно через 3-6 недель после заражения. На коже или слизистой появляется твердый шанкр – язва с плотным дном и плотными приподнятыми краями, напоминающими валик. Размеры ее могут быть разными – от 3 мм до 4 см. Иногда возникают два шанкра на разных частях тела. Появление язв сопровождается увеличением лимфоузлов.

Образование не болит, что отличает его от других изъязвлений. Поэтому первое, что должно насторожить – появление странного, долго не проходящего, плотного безболезненного очага, сопровождающегося увеличением лимфоузлов.

Иногда язвы возникают не на коже и слизистой, а в женских половых путях или прямой кишке. В этом случае они выдают себя болями, выделениями из влагалища и появлением крови при дефекации. Шанкр может появиться и в глотке, вызывая охриплость голоса и другие симптомы, похожие на ангину или ларингит.

Любые выделения из половых путей и боль при дефекации должны стать причиной обращения к гинекологу или проктологу. Врач проведет осмотр и при необходимости направит на анализ.

Даже при отсутствии лечения язвочки постепенно затягиваются. Но это не значит, что болезнь прошла. Примерно через 10 дней начинается вторичный период – на теле появляется обильная бледно-розовая сыпь, похожая на звёздное небо. Снова увеличиваются лимфоузлы. В паховой области появляются наросты – широкие кондиломы, в которых содержится возбудитель. В отличие от остроконечных кондилом, эти наросты имеют более темный цвет, а при надавливании выделяют жидкость.

Высыпания на теле и половых органах, особенно сопровождающиеся увеличением лимфоузлов, – повод провериться на это заболевание.

Если проигнорировать симптомы и не начать лечиться, возникнет третичная форма болезни с поражением нервов, костей, выпадением волос, появлением незаживающих язв. Часто при этом разрушаются носовые кости. У пациента проваливается переносица и возникает «нос бульдога» – типичный признак запущенной болезни.

Заражение во время беременности приводит к рождению больных детей, которые часто умирают в первые дни или месяцы жизни.

Нужно ли сдавать анализ при отсутствии симптомов

Поскольку заболевание очень опасно, на него нужно периодически проверяться даже при отсутствии симптомов. Анализ проводится:

  • При возможности заражения, например, при сомнительных половых отношениях или обнаружении болезни у контактных лиц.
  • На этапе подготовки к оперативным вмешательствам.
  • При планировании беременности .
  • При проведении медосмотров и профилактическом обследовании сотрудников, работающих с пищевыми продуктами и обслуживающих население.
  • При всех видах донорства.

Подготовка к анализам

Диагностика проводится строго натощак. За 30 минут до проведения диагностики нельзя курить. Других ограничений для проведения процедуры нет. Для большинства исследований берется кровь из вены, но при некоторых методиках она может браться и из пальца.

Методы обнаружения болезни

Микрореакция, RPR-реакция – современный вариант известной реакции Вассермана. Это быстрый и простой метод, применяемый при профилактических осмотрах и других случаях первичной диагностики.

Анализ достаточно точен, но иногда дает ложноположительные реакции, связанные с особенностями организма пациента и сопутствующими болезнями. В этом случае результат перепроверяется с помощью других методик.

ПЦР-реакция находит трепонем по участкам их генного материала. Метод позволяет обнаружить спирохеты даже при небольшой их концентрации. Анализ практически не дает ложноположительных и ложноотрицательных результатов, поскольку реактивы, применяемые для его проведения, срабатывают только на этого возбудителя.

Иммуноферментный метод (ИФА), основанный на обнаружении антител к трепонеме. Любой микроорганизм, в том числе и возбудитель сифилиса, является чужеродным для организма, поэтому иммунная система в ответ на его внедрение выделяет особые белковые соединения – антитела:

  • Иммуноглобулины класса М (IgM), первыми вступающие в борьбу с непрошенными «гостями».
  • Иммуноглобулины класса G (IgG), выделяющиеся позже – в разгар болезни.

ИФА-метод применяется в качестве уточняющего при положительной микрореакции, а также при исследовании контактных лиц и доноров. Однако его можно использовать и в качестве первичного анализа.

Соединяясь с антигенами трепонем, они образуют структуры, которые и обнаруживаются в анализе. При проведении анализа можно определить не только наличие антител, но и их концентрацию, зарегистрировав ее рост или снижение. Для этого придется обследоваться несколько раз.

Определение примерного времени заражения по концентрации IgM и IgG

Результат анализа Причина
Антитела класса IgM
Обнаружение IgM. Рост концентрации в течение 7 дней Первичное «свежее» заражение
Антитела класса IgG
Обнаружение IgG 3-4 недели со времени инфицирования
Рост IgG и преобладание над IgM 6 недель с момента заражения
Стабильный показатель IgG Давно произошедшее заражение. Иммуноглобулин остается в крови длительное время

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) – методика, при которой также выявляются антитела в сыворотке крови. Для этого используются специальные реактивы на основе бараньих эритроцитов, реагирующие на антитела (IgM) (IgG), вырабатываемые организмом при сифилисе.

При обнаружении возбудителей образец становится темно-красным за счет склеивания красных кровяных телец. Тестирование имеет 96-100% точность. Ошибки случаются при тяжелых инфекциях и системных заболеваниях типа красной волчанки. В этом случае результат проверяется с помощью других методик.

РПГА и ИФА-анализы, основанные на исследовании плазмы крови, дают результаты даже до появления первых симптомов болезни. Их также применяют для контроля излеченности.

Поскольку разные виды антител появляются на разных этапах развития инфекции, определив концентрацию IgM и IgG, можно узнать примерно, когда произошло заражение.

При любых подозрениях на возможность заражения сифилисом лучше перестраховаться и сдать анализы. Лабораторная диагностика позволит вовремя выявить инфекцию и пролечиться, избежав тяжелых осложнений.

Оставьте комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.